Pipete su laboratorijska oprema koja se koristi za mjerenje i prijenos vrlo malih količina tekućina. Točnost mjerenja pipete vrlo je važna jer razlike u volumenu ispuštene pipetom mogu utjecati na eksperimentalne rezultate. Kako bi se osigurala točnost, važno je provjeravati kalibraciju pipete svakih nekoliko mjeseci. Postupak kalibracije koristan je za provjeru kaplje li iz ove opreme tekućine u odgovarajućem volumenu, pa se po potrebi mogu popraviti.
Korak
Dio 1 od 2: Provjera kalibracije
Korak 1. Prikupite potrebne materijale
Za provjeru umjeravanja pipete potrebne su pipeta, vrhovi pipeta, destilirana voda, čaša, termometar, vaga i čaša za vaganje. Vaga koja se koristi mora biti u mikrogramskoj ljestvici za kalibriranje mikropipete s maksimalnom vrijednošću od 1 L.
- Neće vam trebati više od 5 ml vode. Čašu napunite vodom.
- Provjerite je li vrh pipete ispravan i dobro pristaje u pipetu.
Korak 2. Izmjerite temperaturu destilirane vode
Stavite termometar u vodu i pustite ga da odstoji najmanje minutu. Ako se crvena linija termometra i dalje pomiče, pričekajte još minutu. Nakon jedne minute zabilježite temperaturu. Uzmite termometar i osušite ga kad završite.
Temperaturu vode važno je znati jer će se koristiti za proračune za provjeru umjeravanja
Korak 3. Stavite čašu za vaganje na vagu i postavite vagu na nulu
U idealnom slučaju, vaga koja se koristi ima vrata i izolirani prostor unutra. Stavite posudu za vaganje u komoru za vaganje i zatvorite vrata. Ako vaša vaga nema kabinu i vrata, samo stavite vagu na vagu. Pritisnite tipku “Nula” ili “Tara” i pričekajte da vaga pokaže nulu.
Nultiranje vage smanjuje težinu plastične čaše i omogućuje vam vaganje samo težine tvari stavljene u čašu
Korak 4. Pripremite pipetu za umjeravanje
Obrišite pipetu etanolom prije početka i provjerite da ništa ne začepljuje vrh pipete. Pričvrstite ispravan vrh pipete na vrh pipete i odredite volumen koji ćete testirati.
Za kalibraciju testirajte najmanji i najveći volumen koji se može ukloniti iz pipete
Korak 5. Operite vrh pipete prije kalibriranja
Pritisnite gumb do prve granice i umočite vrh pipete u destiliranu vodu na dubinu od približno 2 mm. Otpustite gumb da upije dio tekućine, a zatim ponovno otpustite tekućinu pritiskom na gumb. Ponovite ovaj korak tri puta za ispiranje vrhova kapaljke prije uporabe.
Pritisnite gumb do druge granice kako biste uklonili preostalu tekućinu s vrha pipete, a zatim izvadite pipetu iz vode
Korak 6. Usisajte kalibracijski volumen
Dok je vrh pipete postavljen izvan destilirane vode, pritisnite gumb do prve granice. Uronite vrh pipete 2 mm duboko u destiliranu vodu i otpustite gumb za usisavanje tekućine u vrh pipete. Pričekajte oko 1 sekundu prije nego što izvadite vrh kapaljke iz vode.
Uvjerite se da je vrh pipete potpuno potopljen tijekom procesa usisavanja. Na vrhu kapaljke ne smije biti mjehurića ili bi rezultat mogao biti pogrešan
Korak 7. Ulijte tekućinu u posudu za vaganje na vagu
Postavite vrh pipete na dno čaše za vaganje, a zatim pritisnite gumb pipete do prve granice. Premjestite se na drugu točku, malo dalje od vode, a zatim pritisnite gumb do druge granice. Držeći gumb pritisnutim, podignite vrh pipete iz čaše za vaganje.
Držite vrh pričvršćen na pipetu jer ćete ga ponovno koristiti za neka druga kalibracijska ispitivanja
Korak 8. Zabilježite težinu prikazanu na vagi
Zatvorite vrata kabine za ravnotežu ako koristite vagu za vagu. Pričekajte dok se brojke više ne promijene. Zapišite u svoju bilježnicu.
Važno je pričekati da se brojevi na ljestvici ponovno promijene prije nego ih zapišete. Bilješke će krenuti krivo ako ne pričekate
Korak 9. Ponovite ovaj postupak za čitanje najmanje 10 puta
Ponovno nulirajte vagu, operite vrhove pipeta prije uporabe, isisajte istu količinu tekućine, uklonite volumen, a zatim zabilježite težinu. Zabilježite težinu destilirane vode za isti volumen, a zatim prosječno ispišite sve bilješke.
Ovaj postupak možete ponoviti za različite sveske ako se svaki svezak testira više puta
Dio 2 od 2: Izračunavanje rezultata kalibracije
Korak 1. Definirajte formulu za izračunati volumen
Formula za izračun volumena tekućine koju izbacuje pipeta je V = w * Z, w je težina vode, Z je faktor pretvorbe temeljen na gustoći vode, dok je V volumen količine vode uklonjena.
- Varijabla Z može se dobiti izračunavanjem gustoće vode pomoću temperature zabilježene na početku pokusa.
- Na primjer: Ako je temperatura vode 23 ° C, vrijednost Z je 1,0035 g/mg.
Korak 2. Izračunajte ukupni prosjek kalibracija pipete
Količina vode koju ispušta pipeta izmjerena je najmanje deset puta. Da biste procijenili sve ove vrijednosti, zbrojite ih sve i podijelite s 10. Ako ste izvršili više ili manje procesa, zbrojite ukupne rezultate, a zatim ih podijelite s brojem provedenih pokusa.
- Na primjer: Težina vode iz 10 pokusa koje ste izveli s pipetom od 10 μL je sljedeća: 9, 89, 10, 01, 10, 02, 9, 99, 9, 95, 10, 04, 9, 96, 10, 01, 9, 99 i 9, 98.
- Prosječna vrijednost je: (9, 89 + 10, 01 + 10, 02 + 9, 99 + 9, 95+ 10, 04 + 9, 96 + 10, 01 + 9, 99 + 9, 98)/10 = 99, 84 /10 = 9.984
Korak 3. Uključite varijable u jednadžbu i riješite
Nakon što odredite točan broj za svaku varijablu, uključite je u formulu i dovršite izračunati volumen. Da biste riješili ovu jednadžbu, jednostavno pomnožite prosječnu težinu svih ispitivanja s vrijednošću Z.
Na primjer: V = w * Z = 9.984 * 1.0035 = 10, 019
Korak 4. Izračunajte točnost pipete
Upotrijebite jednadžbu A = 100 x Vprosj/V0 za izračunavanje točnosti pipete. A označava točnost pipete, Vprosj je izračunati srednji volumen, a V0 je vrijednost postavljena na pipeti. Vrijednost točnosti treba biti između 99-101%.
- Ako je pipeta pravilno kalibrirana, izračunata vrijednost trebala bi biti vrlo blizu stvarne vrijednosti postavljene na pipeti.
- Na primjer: A = 100 x Vprosj/V0 = 100 x 10, 019/10 = 100 x 1,0019 = 100,19%
- Ova pipeta je pravilno kalibrirana.
Korak 5. Ako je potrebno, pošaljite pipetu na kalibraciju
Ako vaša pipeta ne prođe kalibracijski test, nemojte je odmah koristiti za eksperimentiranje. Pipete su vrlo krhka i skupa laboratorijska oprema. Ne možete sami popraviti kalibraciju, pipetu morate poslati na popravak. Alternativno, nekoliko tvrtki će doći u vaš laboratorij i kalibrirati pipetu na licu mjesta.
